簡要描述:QIAGEN RNeasy Mini Kit數(shù)分鐘內(nèi)快速純化得到高品質(zhì)總RNA即用型RNA在各種下游應(yīng)用中表現(xiàn)良好少量起始樣本,RNA產(chǎn)量穩(wěn)定無需酚/ LF抽提,無需氯化銫梯度離心,無氯化鋰或者乙醇沉淀步驟
產(chǎn)品分類
Product Category詳細(xì)介紹
品牌 | Qiagen/凱杰 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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主要用途 | 從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
QIAGEN RNeasy Mini Kit
從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA
RNeasy Mini Kit可從細(xì)胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA,硅膠膜RNeasy離心柱的結(jié)合能力達(dá)100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩(wěn)定組織樣本,使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動(dòng)純化儀上應(yīng)用RNeasy Mini Kit實(shí)現(xiàn)RNA純化自動(dòng)化。處理更小或更大的樣本,可使用RNeasy Micro Kit(離心柱結(jié)合能力為45 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(離心柱結(jié)合能力為6 mg RNA)。
貨號(hào)/ ID:74104 RNeasy迷你套件(50) 50個(gè)RNeasy微型旋轉(zhuǎn)柱,收集管(1.5 ml和2 ml),無RNase的試劑和緩沖液 |
貨號(hào)/ ID:74106 RNeasy迷你套件(250) 250個(gè)RNeasy微型旋轉(zhuǎn)柱,收集管(1.5 ml和2 ml),無RNase的試劑和緩沖液 |
RNeasy Mini Kit適用于分子生物學(xué)應(yīng)用。該產(chǎn)品不適用于疾病的診斷、預(yù)防或治療。
QIAGEN RNeasy Mini Kit
來自各種樣品的高質(zhì)量RNA。
甲醛瓊脂糖凝膠和使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的Northern印跡。每個(gè)泳道上樣的是從每種來源分離出的總RNA(10 µg)。所有組織均來自小鼠。酵母:釀酒酵母;大腸桿菌菌株:HB101。32個(gè)P標(biāo)記的探針被識(shí)別為(G)GAPDH;(E)翻譯延伸因子EF-1α;(O)外膜蛋白A序列。(E和O分別由瑞士巴塞爾大學(xué)的P. Philippsen和德國圖賓根的馬克斯·普朗克生物學(xué)研究所的U. Henning分別提供。)未檢測(cè)到枯草芽孢桿菌。中號(hào):0.24-9.5kb RNA階梯。胚胎,Huh7和HeLa細(xì)胞泳道中的7.5 kb帶(指示)是核前體RNA。
性能
RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動(dòng)物或人類組織樣本,或從100–1 x 107個(gè)動(dòng)物或人類細(xì)胞樣本或酵母中純化總RNA(參見"RT-PCR of RNA from as few as 100 cells"和"High-quality RNA from a variety of samples")。
樣本來源 | 起始材料 | 平均產(chǎn)量(µg) |
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動(dòng)物細(xì)胞 LMH HeLa COS-7 淋巴細(xì)胞(未受激) | 1 x 10 6 1 x 10 6 1 x 10 6 1 x 10 6 | 12 15 35 0.5 |
小鼠組織 肝 肺 脾 | 10毫克 10毫克 10毫克 | 40 10 35 |
真菌細(xì)胞 S. cerevisiae | 1 x 10 7 | 25 |
原理
RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。
程序
RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個(gè)動(dòng)物或人類細(xì)胞中、0.5–30 mg動(dòng)物或人類組織中或小于5 x 107個(gè)酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對(duì)樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜(參見"RNeasy Mini spin column")。RNA結(jié)合到膜上(多可結(jié)合100 µg),污染物被高效洗去。對(duì)于某些對(duì)少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用,可在RNeasy操作過程中進(jìn)行柱上DNA酶處理,去除DNA殘留。之后可在30–100 µl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA(參見"RNeasy Mini procedure")。還有各種特殊應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方案可供選擇。
應(yīng)用領(lǐng)域
使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1(10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中),適用于多種下游應(yīng)用,包括:
Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡
終點(diǎn)式RT-PCR
定量real-time RT-PCR
芯片分析
Poly A+ RNA篩選
特征 | 技術(shù)指標(biāo) |
應(yīng)用 | PCR,qPCR,實(shí)時(shí)RT-PCR,微陣列 |
洗脫體積 | 30–100微升 |
規(guī)格 | 旋轉(zhuǎn)柱 |
主要樣本類型 | 組織,細(xì)胞 |
處理 | 手動(dòng)(離心) |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 總RNA |
樣本量 | 0.5–30毫克 |
技術(shù) | 二氧化硅技術(shù) |
每次運(yùn)行或制備時(shí)間 | 20分鐘 |
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